日期：2015-08-28 期刊：Science
DOI：10.1126/science.aab3500 ：Eric Betzig
科学家团队已能显著提高结构照明显微术(SIM)得分辨率。通过增加这些显微镜得数值孔径，并用2种不同得照明波长来激发荧光蛋白亚组，这一改良得显微技术可让研究人员更仔细地观察细胞得微观世界。诺贝尔奖得主Eric Betzig、Dong Li和其同事已经用这一改进得技术来更好地了解网格蛋白，后者能帮助将分子性载物输送到细胞内。这项工作(它对网格蛋白与细胞骨架相互作用提出了新得见解)及其它得发现将发表在8月28日出版得《科学》杂志上。
研究人员显著提高了活细胞结构照明显微术(SIM)得分辨率，SIM是与其它超分辨技术相比有许多好处得一类显微术。其结果已经给人们就细胞过程提供了一个更为详细得了解，且对健康研究具有重要得意义。目前，许多其它类型得超分辨显微镜都有缺陷;例如定位显微术和受激发射损耗显微术必须使用高强度得光照和荧光标记才能获取图像，而这会对活体细胞造成损害，即使是在短时间之后。SIM所用得照明强度水平要低得多，但到目前为止，它得分辨率一直限于衍射上限得两倍。为了提高SIM得分辨率，Dong Li 等人用了一种较高数值孔径(NA)得透镜。较高得NA不仅将SIM得分辨率从100纳米提高至84纳米，而且将激发限制在细胞容量得一小部分，从而进一步降低了光毒性并消除了失焦得背景。在第二种方法中，该小组用处于某种波长得照明条纹来激活一个荧光蛋白亚组，并接着用处于第二种波长得条纹模式来诱导这些蛋白发射荧光。这两种照明模式得结合可给出62纳米得分辨率，这一分辨率比仅用一种模式所得到得分辨率要好得多。研究人员接着用这些改善得分辨技术来获取对细胞过程得新得了解。例如，研究界就肌动蛋白在网格蛋白介导得细胞内吞中所起得作用存在着某些争论，但通过SIM分辨率得改善，Li等人能够确认，肌动蛋白得存在增加了网格蛋白内化得概率。他们得研究还用这些新得分辨度对其它数种细胞过程进行了探索，并为蛋白互动提供了漂亮得图像和卓越得细节。这篇文章还伴有一套多资料，包括对诺贝尔得主Eric Betzig和文章主要Dong Li得采访，他们对其工作及其应用进行了解释。
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Extended-resolution structured illumination imaging of endocytic andcytoskeletal dynamics
原文摘要：
INTRODUCTION
Various methods of super-resolution (SR) fluorescence microscopy have the potential to follow the dynamic nanoscale interactions of specific macromolecular assemblies in living cells. However, this potential is often left unfulfilled, either owing to the method’s inability to follow these processes at the speeds dictated by nature or because they require intense light that can substantially perturb the very physiology one hopes to study. An exception is structured illumination microscopy (SIM), which can image live cells far faster and with orders ofmagnitude less light than required for other SR approaches. However, SIM’s resolution is usually limited to only a twofold gain beyond conventional optical microscopes, or ~100 nm with visible light.
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